固定相相似相溶原理,选择非极性的固定液分析非极性化合物。
若化合物能用不同极性的固定相分析,首先选择最小极性的固定相。
一般固定相使用寿命:非极性>中极性>极性。
长度分辨率色色谱柱长度的平方成正比。在其它条件不变的情况下,分辨率提高1倍,桩长需要增加4倍。
5-15m短柱:分离少于10个组分的简单样品。
25-30m中长柱:分离10-50个组分的样品。
≥50m长柱:分离多余50个组分或包含有难分离物质对的复杂样品。
内径色谱柱内径直接影响柱子的柱效、保留特性和样品负荷量。
0.53mm:具有类似填充柱的负荷量,总柱效远远超过填充柱。当达到相同的分离度时,0.53mm大口径柱的分析时间明显比填充柱快。适用于分析不太复杂的样品。是填充柱理想的代替柱。
0.32mm:柱效低于0.25mm常规柱,负荷量较常规柱高约60%,用特制注射针可做柱上进样。
0.25mm:最常用的内径规格,柱效较高,负荷量较低,必须分流进样,用于复杂多组分样品的分析。
0.20mm:柱效高,负荷量低,流失较小,适合与质谱等高灵敏检测器联用。
膜厚液膜厚度影响柿子的保留特性和柱容量
0.10-0.20um(薄液膜):负荷量低,高温下流失较小,适合于高沸点化合物的分析,适用于配高灵敏检测器。
0.25-0.33 um(标准液膜):一般商品柱的标准液膜。
0.50-5.00 um(厚液膜):负荷量较高,在高温下流失较大,适宜于分析低沸点样品。
静态法涂柱液膜厚度的计算经验公式:
d=DC/400
d:液膜厚度(μm); D:毛细管直径(μm); C:涂渍液百分浓度。